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    • 技術(shù)文章/ TECHNICAL ARTICLES

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      PCR基因擴增儀可滿足苛刻的實驗需求

      更新時間:2020-08-21      瀏覽次數(shù):1678
       
        
        PCR基因擴增儀采用專有的技術(shù),有效避免了熱傳導(dǎo)的邊緣效應(yīng)問題,為PCR實驗提供溫度均一性,確保實驗結(jié)果的可靠性和重復(fù)性,溫控系統(tǒng),模式顯示金屬模塊的溫度變化,能模擬試管內(nèi)試劑的溫度變化,甚至考慮到了PCR反應(yīng)體系對溫度變化的影響,模塊具有溫度梯度功能,為前沿科研工作者提供30℃的溫度梯度范圍,滿足苛刻的優(yōu)化實驗需求。
        
        PCR技術(shù)的本質(zhì)是體外核酸擴增,加熱使雙鏈DNA解開螺旋,在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交,在TaqDNA聚合酶,dNTPs,Mg2+和合適pH緩沖液存在條件下延伸引物,重復(fù)“變性→退火→引物延伸”過程至25~40個循環(huán),呈指數(shù)級擴大待測樣本中的核酸拷貝數(shù)。PCR擴增時加入的引物利用熒光素進(jìn)行標(biāo)記,使引物和熒光探針同時與模板進(jìn)行特異性結(jié)合,擴增結(jié)果通過熒光信號采集系統(tǒng)實時采集信號并輸送到計算機分析處理系統(tǒng),實時輸出量化結(jié)果,這樣的PCR儀叫實時熒光定量PCR儀。
        
        PCR基因擴增儀不僅擁有30℃的寬限梯度功能,可用來優(yōu)化實驗條件,滿足苛刻的實驗需求,同時延續(xù)了“USB”和聯(lián)機聯(lián)網(wǎng)功能,在之前基礎(chǔ)上,增加了LCD彩色觸摸屏,使實驗的顯示和操作更為清晰和直接。
        
        PCR基因擴增儀的PCR由變性、退火、延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成。
        
        1.模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;
        
        2.模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合;
        
        3.引物的延伸:DNA模板-引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性、退火、延伸三過程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”,而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時就能將待擴增的目的基因擴增放大幾百萬倍。

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